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基因工程技术原理与应用(三)
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[简答题]一双链DNA分子如下图所示,在体内它编码5个氨基酸残基的多肽:
5’TAC ATG ATC ATT TCA CGG AAT TTC TAG CAT GTA3’
3’ATG TAC TAG TAA AGT GCC TTA AAG ATC GTA CAT5’
哪条链是转录的模板链
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[单项选择]下列常用于原核表达体系的是( )。
A. 酵母细胞
B. 昆虫细胞
C. 哺乳类细胞
D. 真菌
E. 大肠杆菌
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[单项选择]选用融合蛋白的表达策略的主要优点是( )。
A. 容易检测表达蛋白
B. 构建表达载体方便
C. 表达产物较稳定
D. 易获得有天然活力的蛋白质
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[单项选择]同一种质粒DNA可以以三种不同的形式存在,它们的迁移速率是( )。
A. oc DNA>sc DNA>1DNA
B. sc DNA>1DNA>oc DNA
C. 1DNA>oc DNA>sc DNA
D. sc DNA>oc DNA>1DNA
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[单项选择]基因工程中,可以用碱性磷酸酶( )。
A. 防止DNA的自身环化
B. 降解DNA样品中混杂的RNA
C. 制备突出的3’端
D. 上述方法都正确
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[简答题]利用双脱氧链终止法测定仪DNA片段的碱基序列获得如下图谱。
写出作为模板的DNA链的碱基序列,标出5’和3’端。
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[单项选择]外源基因在大肠杆菌中高效表达受很多因素影响,其中SD序列的作用是()。
A. 提供一个mRNA转录终止子
B. 提供一个mRNA起始点
C. 提供一个核糖体结合位点
D. 提供一个翻译的终点
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[单项选择]以质粒为载体将外源基因导入受体菌的过程称()。
A. 转化
B. 转染
C. 感染
D. 转导
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[单项选择]在蓝白斑筛选法中,IPTG的作用是( )。
A. 诱导宿主合成β-半乳糖苷酶的羧基端
B. 诱导宿主合成β-半乳糖苷酶的氨基端
C. 作为酶反应的底物
D. 作为显色反应的指示剂
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[单项选择]用下列方法进行重组体的筛选,表明出现了外源基因的产物的方法是( )。
A. Southern印迹
B. Northern印迹
C. Western印迹
D. 菌落原位杂交
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[单项选择]DNA被某限制性内切核酸酶切割后,电泳得到的电泳带有些扩散,下列原因中哪一项不太可能( )
A. 酶失活
B. 底物DNA不纯,污染有蛋白质
C. 酶切条件不合适
D. 由外切核酸酶污染
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[单项选择]T4 DNA连接酶是从T4噬菌体感染的E.coli中分离的,这种酶( )。
A. 催化连接反应时既能以ATP又能以NAD作为能量来源
B. 既能催化平末端连接又能催化黏性末端连接
C. 是一种单肽酶,分子质量为74kDa
D. 既能催化单链DNA连接又能催化双链DNA连接
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[单项选择]以质粒为载体将重组DNA导入受体细胞的过程称为()。
A. 转化
B. 转导
C. 接合
D. 转染
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[单项选择]基因组代表一个细胞或生物体的( )。
A. 部分遗传信息
B. 整套遗传信息
C. 可转录基因
D. 非转录基因
E. 可表达基因
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[单项选择]用菌落原位杂交法筛选重组子时,( )。
A. 需要外源基因的转录产生mRNA,才能进行。
B. 需要外源基因的翻译产生蛋白质,才能进行。
C. 所用探针必须与克隆的基因有同源性
D. 上述说法都正确
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[单项选择]要对一双链的DNA分子进行3’端标记可用( )。
A. Klenow酶
B. DNA聚合酶Ⅰ
C. T4 DNA聚合酶
D. T7 DNA聚合酶
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[单项选择]构建基因组DNA文库时,首先需要分离细胞的( )。
A. 染色体DNA
B. 线粒体DNA
C. 总mRNA
D. tRNA
E. rRNA
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[单项选择]就分子结构而论,质粒是()。
A. 环状双链DNA分子
B. 环状单链DNA分子
C. 环状单链RNA分子
D. 线状双链DNA分子
E. 线状单链DNA分子
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[简答题]利用Ti质粒把卡那霉素抗性基因(kanamycin resistanee gene)转化入烟草细胞并获得两株具有抗性的植株。植株1与野生型杂交获得的子代植株中50%具有抗性,50%敏感;植株2与野生型杂交则获得了75%的抗性植株和25%的敏感植株。你如何解释这样的结果
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[单项选择]下列哪种酶不能用于聚合酶链反应(PCR)( )
A. Taq DNA合成酶
B. T7 DNA合成酶
C. 引物酶
D. Klenow片段
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[单项选择]RFLP产生自()。
A. 使用不同的限制性内切核酸酶
B. 每种类型的染色体有两条
C. 染色体中碱基的随机变化
D. Southern印迹
E. 不同探针的使用
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[单项选择]为了正确地构建一个真核基因组的物理图谱( )。
A. 必须分离单条染色体
B. 必须从单倍体细胞中分离DNA,这样避免由于二倍体细胞中同源染色体的存在而产生的干扰
C. 必须进行单个染色体分析
D. 必须找到对于每个染色体只切割一次的限制酶
E. 必须首先分离核DNA和细胞器DNA,然后分别对它们作图
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[单项选择]关于DNA接头在基因工程中的作用,下面的说法中哪一项不正确( )
A. 给外源DNA添加适当的酶切位点
B. 人工构建载体
C. 调整外源基因的可读框
D. 增加调控元件
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[单项选择]PCR变性温度一般为( )。
A. 94℃
B. 85℃
C. 72℃
D. 62℃
E. 55℃
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[单项选择]cDNA是指( )。
A. 在体外经反转录合成的与RNA互补的DNA
B. 在体外经反转录合成的与DNA互补的DNA
C. 在体外经转录合成的与DNA互补的RNA
D. 在体内经转录合成的与DNA互补的RNA
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[单项选择]在对目的基因和载体DNA进行同聚物加尾时,需采用( )。
A. 反转录酶
B. 多聚核苷酸激酶
C. 引物酶
D. RNA聚合酶
E. 末端转移酶
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[单项选择]关于质粒的相容性,下面哪种说法不正确( )
A. 不同不相容群的质粒能够共存于同一细胞中
B. 质粒可以分为若干个不相容群,但不能分为若干相容群
C. 如果a、b两种质粒不相容,说明它们的复制机制相同
D. 属于同一个不相容群的质粒,不仅复制机制相同,而且拷贝数和相对分子质量也相同
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[简答题]细菌的glucuronidase可以把无色化合物X-Glu转变为蓝色物质。如果给它添加一个植物启动子,它也可以在植物细胞中起作用。你如何利用该基因作为报道基因来研究你刚刚克隆的一个植物基因在正常情况下在哪些组织中起作用
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[单项选择]cDNA文库包括该种生物的( )。
A. 某些蛋白质的结构基因
B. 所有蛋白质的结构基因
C. 所有的结构基因
D. 内含子和调控区
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[简答题]在酵母中,你已经测定了一段野生型DNA的序列,其中很显然含有一个基因,但其功能未知。为了对其进一步研究,就有必要获得其突变后的表型。你如何利用已经克隆的野生型基因做到这一点
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[单项选择]下面关于松弛型质粒性质的描述中,不正确的是( )。
A. 质粒的复制只受本身的遗传结构的控制,而不受染色体复制机制的制约
B. 可以用氯霉素作用进行扩增
C. 通常带有抗药性标记
D. 同严紧型质粒融合后,杂合质粒优先使用松弛型复制子
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[简答题]如何利用T4 DNA聚合酶进行双链DNA的3’端标记
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[单项选择]关于穿梭质粒载体,下面哪一种说法最正确( )
A. 在不同的宿主中具有不同的复制机制
B. 在不同的宿主中使用不同的复制起点
C. 在不同的宿主中使用不同的复制酶
D. 在不同的宿主中具有不同的复制速率
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[单项选择]在已知序列信息的情况下,获取目的基因的最方便方法是( )。
A. 化学合成法
B. 基因组文库法
C. cDNA文库法
D. 聚合酶链反应
E. 差异显示法
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[单项选择]在下列进行DNA部分酶切的条件中,控制哪一项最好()
A. 反应时间
B. 酶量
C. 反应体积
D. 酶反应的温度
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[单项选择]下列哪个酶要求有引物才能发挥作用( )。
A. 限制性内切核酸酶
B. DNA连接酶
C. 末端转移酶
D. 反转录酶
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[单项选择]下面哪一种不是产生星号活性的主要原因( )
A. 甘油含量过量
B. 反应体系中含有有机溶剂
C. 含有非Mg2+的二价阳离子
D. 酶切反应时酶浓度过低
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[单项选择]随机引物标记探针,下列各项中哪一项是不正确的( )
A. 双链DNA、单链DNA、RNA都是可以标记的
B. 不需用DNA酶Ⅰ预处理
C. 反应时可用Klenow酶
D. 反应时可用DNA聚合酶Ⅰ
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[单项选择]基因工程技术常用的限制性内切核酸酶为()。
A. Ⅰ类酶
B. Ⅱ类酶
C. Ⅲ类酶
D. Ⅳ类酶
E. Ⅴ类酶
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[单项选择]限制性内切核酸酶切割DNA后产生()。
A. 3’磷酸基末端和5’羟基末端
B. 5’磷酸基末端和3’羟基末端
C. 3’磷酸基末端和5’磷酸基末端
D. 5’羟基末端和3’羟基末端
E. 3’羟基末端、5’羟基末端和磷酸
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[简答题]按照适当的顺序,列出将一种mRNA经反转录克隆到表达载体所用到的酶。
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[单项选择]限制性片段长度多态性是( )。
A. 用于遗传的“指纹结构”模式分析的技术
B. 二倍体细胞中的两个等位基因限制性图谱的差别
C. 物种中的两个个体限制性图谱的差别
D. 两个物种中个体间的限制性图谱的差别
E. 两种酶在单个染色体上限制性图谱的差别
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[单项选择]α互补筛选法属于( )。
A. 抗药性标志筛选
B. 酶联免疫筛选
C. 标志补救筛选
D. 原位杂交筛选
E. 免疫化学筛选
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[单项选择]限制性内切核酸酶可以特异性的识别( )
A. 双链DNA的特定碱基对
B. 双链DNA的特定碱基序列
C. 特定的三联体密码
D. 以上都正确
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[单项选择]黏粒是一种人工构建的载体,( )。
A. 具有cos位点,因此可以进行体外包装
B. 具有质粒DNA的复制特性,必须利用CaClz制备的感受态细胞转化入大肠杆菌
C. 进入受体细胞后,可引起裂解反应
D. 进入受体细胞后,可引起溶原化反应
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[单项选择]关于多克隆位点的描述不正确的是()。
A. 仅位于质粒载体中
B. 具有多种酶的识别序列
C. 不同酶的识别序列可以有重叠
D. 一般是人工合成后添加到载体中的
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[单项选择]Klenow酶与DNA聚合酶相比,前者丧失了( )活性。
A. 5’→3’合成酶
B. 3’→5’外切酶
C. 5’→3’外切酶
D. 转移酶
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[简答题]利用双脱氧链终止法测定仪DNA片段的碱基序列获得如下图谱。
写出由引物合成的DNA核苷酸链的碱基序列,标出5’和3’端;
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[简答题]作为一个理想的质粒载体必须具备什么样的特征
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[单项选择]分析限制性内切核酸酶切割DNA所得到的片段长度有助于物理作图,这是因为( )。
A. 即使只有一种限制酶,因为DNA是线性的,所以也可以迅速准确确定限制片段序列
B. 内切酶在等距离位点切割DNA,同时对于每个生物体的长度是特异的
C. DNA的线性意味着单限制酶切片段的长度之和等于DNA的总长
D. 内切酶的消化活性是物种特异的
E. 这一技术同时为核苷酸序列提供了广泛信息
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[单项选择]在切口平移标记DNA探针时只能使用( )。
A. Klenow酶
B. DNA聚合酶Ⅰ
C. DNA聚合酶Ⅱ
D. DNA聚合酶Ⅲ
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[单项选择]Ti质粒( )。
A. 存在于所有农杆菌细胞中
B. 作为双链DNA被转移
C. 在植物中导致肿瘤
D. 在植物细胞中作为染色体外质粒