[简答题]如何通过基因标签来分离基因？

参考答案: 通过转座子或转基因制造插入突变，可使受破坏的位点打上“标签”，称基因标签。转座子(如Ac-Ds，P元件等)或T-DNA插入突变可制造标签，直接定位突变基因。以PCR为基础的技术可用于直接扩增转座子或转基因标签侧翼的基因组DNA，寻找突变基因，避开构建基因组文库。利用反向PCR可以完成基因的分离，基因组DNA用限制性内切酶消化；插入标签中没有该酶切位点，所以其中一个片段中应带有完整的插入序列，使该片段通过连接，自行环化形成环状DNA，PCR引物在转座子标签的边缘退火并朝向外部，可以扩增出侧翼基因组序列，对此序列进行快速鉴定，找出与突变表型相关的基因，或作为探针，筛选DNA文库，分离完整克隆。