[简答题]简述 DNA和 RNA连接酶的催化反应机制。

参考答案: 所有已发现的DNA连接酶以及RNA连接酶在作用过程中都形成两种以共价键相接的中间产物，
即：（1）酶与AMP的络合物（E-A）；
（2）底物与AMP的络合物（DNA-A）。
催化反应分三步进行：
① 酶—核苷酸中间产物的形成：将NAD或ATP的腺苷酰基团转到连接酶的赖氨酸残基的ε-NH₂ 上形成酶—核苷酸中间产物，如果辅助因子是 NAD’，另一个产物就是NMN，若是用 ATP作为辅助因子，另一个产物就是PPi；
②腺苷酰基团被转移到 DNA末端的5’-P，将 DNA缺口的5’端激活；
③DNA缺口的3’-OH同激活的5’-P 形成磷酸二酯键，释放出AMP。