参考答案:
1)聚合物及其相对的分子量不同聚合物,水相系统显示不同的疏水性,水溶液中聚合物的疏水性依下列次序递增:葡萄糖硫酸盐<甲基葡萄糖<葡萄糖<羟丙基葡聚糖<甲基纤维素<聚乙烯醇<聚乙二醇<聚丙三醇,这种疏水性的差别对目的产物与相的相互作用是重要的。同一聚合物的疏水性随分子量增加而增加。2)pH的影响
pH会影响蛋白质中可离解基团的离解度,因而改变蛋白质所带电荷和分配系数;另外,pH还影响系统缓冲物质磷酸盐的离解程度,从而影响分配系数。
pH微小的变化有时会使蛋白质的K改变2~3个数量级。
体系pH与蛋白质等电点相差越大,蛋白质在两相中分配越不均匀。
3)离子环境对蛋白质在两相体系分配的影响
在PEG/Dex中,无机盐离子在两相中也有不同的分配,因此在两相间形成电位差。由于各相要保持电中性,这对带电生物大分子,如蛋白质和核酸等的分配,产生很大的影响。
4)温度的影响
由于亲水聚合物的多元醇或多糖结构保护了蛋白质,蛋白质在双水相中的稳定性增加,所以一般都可在室温下操作。而且室温时粘度较冷却时低,有助于相的分离并节约了能源开支。
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