第3题: [简答题]根据犯罪现场留下的血迹,法庭上法官对犯罪嫌疑人作出了有罪判决,证据是利用DNA指纹法建立的。请问:何谓DNA指纹法该证据是怎样获取的原理是什么? 参考答案:
DNA指纹技术是检测独特的DNA片段,即限制性片段长度多态性RFLP。因为人染色体高变区的存在,从一个人细胞得到的限制酶切DNA片段的图谱和其他人非常不同,类似人的指纹;称DNA指纹法。证据的获取即RFLP图的产生,原理是利用人染色体的非编码区中有一些由一个小片段高度重复组成的长度为成千上万个碱基对的序列,这些小片段即同向重复序列可变数(variable:number of tandem repeat,VNTR),人与人之间重复片段数量差别很大。在染色体上,许多VNTR区的限制性内切核酸酶酶切位点相连,被限制性内切核酸酶切后,VNTR基因所在片段大小彼此各不相同,产生几乎惟一的图谱。获取的步骤是:首先分离细胞DNA,用一个限制酶PstⅠ酶切并进行琼脂糖凝胶电泳,按DNA的长度分开。第二,相应的VNTR的DNA片段用DNA杂交技术检测,DNA转移到尼龙膜上进行碱变性,然后与其VNTR核心序列互补的探针杂交,经放射自显影分析,得到的显影图上的条带图就是该人的DNA指纹。