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[简答题]可采用哪些方法进行目的片段与载体的连接?

参考答案: (1)目的片段与载体经相同的限制性内切酶或同尾酶切割,产生匹配的粘性末端,可直接进行连接。
(2)目的片段与载体经限制性内切酶切割后,产生平末端,也可直接进行连接。但是由于平末端连接效率较低,可采用下面的方法进行连接。
(3)同聚物加尾法:利用末端转移酶在载体及外源双链DNA的3’端各加上一段寡聚核苷酸,制成人工黏性末端,外源DNA和载体DNA分子要分别加上不同的寡聚核苷酸,如dA(dG)和dT(dC.,然后在DNA连接酶的作用下涟接成为重组的DNA。这种方法的核心是利用末端转移酶的功能,将核苷酸转移到双链DNA分子的突出或隐蔽的3’-OH上。以Mg2+作为辅助因子,该酶可以在突出的3’-OH端逐个添加单核苷酸,如果用Co2+作辅助因子则可在隐蔽的或平末端的3’-OH端逐个添加单个核苷酸。
(4)接头连接法:将人工合成的或来源于现有质粒的一小段DNA分子加到载体或外源DNA的分子上,在这一小段DNA分子上有某种限制性内切核酸酶的识别序列,这样便在载体DNA和外源DNA上制造出新的酶切点,产生匹配的黏末端以便于连接。这一小段含有酶切点的DNA分子称为连接器分子。
(5)PCR接头法:设计含有限制酶切位点的引物,在PCR过程中在目的片段直接加上接头

热门试题:

第1题:[单选题] 关于行政许可设定的说法, 下列哪一选项是正确的?
A.尚未制定法律的, 行政法规可以设定行政许可
B.尚未制定法律、 行政法规的, 国 务院部委规章可以设定临时性的行政许可
C.必要时, 国务院办公厅可以发布通知的 方式设定行政许可
D.地方性法规可以设定有关企业登记的前置性许可
参考答案:A


第2题: [单项选择]
关于急性快速失液下列说法错误的是()
A. 急性快速失液中枢神经及心血管症状很晚出现,组织体征要24h后显现
B. 中枢神经症状与巴比妥类中毒相似,轻度容量不足时容易被忽略
C. 皮肤充盈度在年老及近期体重下降患者中难以判断,无其他证据时无诊断价值
D. 严重容量不足可抑制全身各系统,并妨碍临床判断
E. 腹膜炎引起严重败血症患者,体温白细胞计数均可正常,腹部可无明显体征
参考答案:A
答案解析:急性快速失液中枢神经及心血管症状很早即可出现,而组织体征要24h后方可显现。

第3题:
[判断题]铁路职工或其他人员发现设备故障危及行车和人身安全时,应立即向开来列车显示减速信号,并迅速通知就近车站、工务、电务或供电人员。
A.正确
B.错误
参考答案:B


第4题: [多项选择]
柜员办理收款业务的操作程序主要包括()
A. 审查凭证;
B. 收款;
C. 交易处理;
D. 签章。
参考答案:A, B, C, D

第5题:
[单选题]高度在(  )m以上框架柱钢筋绑扎、焊接时应搭设临时脚手架。
A.1
B.2
C.3
D.4
参考答案:D


第6题:
[判断题]交叉作业时,应采取可靠防护措施。
A.正确
B.错误
参考答案:A


第7题:
[单选题]一般冬季开窗通风的时间为每半日( )。
A.50-60分钟
B.40-45分钟
C.半小时
D.10-15分钟
参考答案:D


第8题:
[多选题]弹性福利模式优缺点包括(  )。
A.可以在一定程度上满足员工的不同需要
B.管理成本相对较低
C.管理成本相对较高
D.设计相对复杂
E.可以提高员工的满意度
参考答案:ACDE
弹性福利模式是指企业在福利的总额控制下,员工可以根据自己的喜好选择不同的福利项目组合。这种模式的优点在于,可以在一定程度上满足员工的不同需要,提高员工的满意度。其缺点在于,设计相对复杂,管理成本相对较高。由于弹性福利计划越来越得到企业的认同,使用的企业越来越多,因此弹性福利制又称为自助餐式的福利,因为员工可以从公司所提供的各种福利项目的菜单中自由选择其需要的福利,就跟吃自助餐一样。

第9题: [单项选择]
城市规划、镇规划分为总体规划和()。
A. 分区规划
B. 简单规划
C. 详细规划
D. 控制性规划
参考答案:C

第10题:
[多选题]钻井作业时发现地层压力异常时,发现溢流、井涌、井漏时,应_____。
A. 关井求压
B. 及时调整钻井液密度
C. 及时压井
D. 向有关部门汇报
参考答案:ABCD


第11题:
[单选题] 对微机个人用户来说,最常见的计算机病毒的传染媒介是( )。
A.键盘
B.软盘和可移动磁盘
C.硬盘
D.打印机
参考答案:B
最常见的计算机病毒的传染媒介是软盘和可移动磁盘等。

第12题:
[判断题]有权提起诉讼的公民死亡,其近亲属可以提起诉讼。
A.正确
B.错误
参考答案:A


第13题:
[单选题]在操作箱中,关于断路器位置继电器线圈正确的接法是()
A.TWJ在跳闸回路中,HWJ在合闸回路中
B.TWJ在合闸回路中,HWJ在跳闸回路中
C.TWJ、HWJ均在跳闸回路中
D.TWJ、HWJ均在合闸回路中
参考答案:B


第14题:
[多选题]带电作业应在良好天气下进行。如遇( )等,禁止进行带电作业。 (建议删除)
A.A-雷电
B.B-雹
C.C-雪
D.D-阴天
参考答案:ABC


第15题: [简答题]
6KV真空接触器的额定电压是多少?
参考答案:6KV真空接触器的额定电压是7.2KV。

第16题: [简答题]
简述锚头鱼蚤病的症状和病理变化。
参考答案: 1)能直接观察虫体:锚头蚤的头部以其头角和一部分胸部转入寄主的肌肉和鳞片下面,裸露在外的虫体上(尤其是成虫)常附着有大量的累枝虫,藻类,钟形虫,舌杯虫,像蓑衣一样,大量寄生时候影响病鱼的活动能力
2)虫体周围组织红肿,化脓,出血,出现一粒粒石榴子般的红斑,即使虫体胞脱落后,红斑仍能保存很久时间
3)较大的鳞片的草鱼鲤鱼鳞片被蛀成缺口,色泽较淡
4)常引起继发性疾病。伤口常引起水霉,细菌性疾病

第17题: [单项选择]
下述哪项检查对肺癌的病理分期最有价值()。
A. 纵隔镜检查
B. 电视胸腔镜检查
C. 纤维支气管镜检查
D. 派特(PET)检查
E. 高分辨CT检查
参考答案:A

第18题:
[单选题]线槽安装位置应符合施工图规定,线槽水平每米偏差不应超过()mm
A.5
B.3
C.2
D.1
参考答案:C


第19题:
[判断题]排烟消防车在排烟机运行的时候发动机转速超过2500 r/min时,大量的液压油通过泄荷阀进行泄荷,长时间这种状态下工作,会造成液压系统油温升高。( )
A.正确
B.错误
参考答案:B


第20题: [单项选择]
牙龈炎症的主要表现之一是()。
A. 牙龈粉红色
B. 龈缘菲薄
C. 牙龈致密坚韧
D. 探诊后出血
E. 探诊深度2mm
参考答案:D
答案解析:探诊出血是牙龈炎症的主要表现之一。

第21题:
[判断题]排烟消防车由底盘、动力传动系统、电气系统、风机系统、水泵系统、液压升降回转系统和接管机构等组成。中)( )
A.正确
B.错误
参考答案:A


第22题: [单项选择]
可导致产后小便淋痛的为()
A. 肾阴亏虚
B. 肾阳亏虚
C. 两者都是
D. 两者都不是
参考答案:A

第23题:
[多选题]有下列情形之一,导致离婚的,无过错方有权请求损害赔偿( )。
A. 重婚
B. 与他人同居
C. 实施家庭暴力
D. 虐待、遗弃家庭成员
参考答案:ABCD


第24题:
[判断题]分动外锁闭道岔铺设后应指定加锁、紧固位置,并做好标记。
A.正确
B.错误
参考答案:A


第25题: [单项选择]
治疗流行性脑脊髓膜炎选用
A. 两性霉素
B. 庆大霉素
C. 磺胺嘧啶
D. 氯霉素
E. 四环素
参考答案:C

第26题:
[单选题]道岔跳线及钢轨连接线应及时盘绕、固定,穿越钢轨的跳线或钢轨连接线距轨底不得小于( )
A.30mm
B.60mm
C.45mm
D.50mm
参考答案:A


第27题:[判断题]【判断题】 数据库检修前,应备份可能受影响的业务数据、配置文件、日志文件等。
.. 中间件检修前,应备份配置文件。
A.正确
B.错误
参考答案:A


第28题:
[单选题] A类作业的施工,经(____)审核批准方可安排施工。
A. 行车调度员
B. 值班站长
C. 行车值班员
D. 值班主任
参考答案:A


第29题:
[单选题]遇天气恶劣,信号机显示距离不足( )时,司机或车站值班员须立即报告列车调度员。
A.100
B.200
C.300
D.400
参考答案:B
《技规》第338条

第30题:
[单选题]天气恶劣难以辨认信号,列车按机车信号的显示运行,当接近地面信号机时,司机应确认地面信号,遇地面信号与机车信号显示不一致时,应立即采取( )措施。
A.减速
B.停车
C.减速或停车
D.减速并停车
参考答案:A


第31题: [单项选择]
宏观调控国家运用宏观经济政策对宏观经济进行的调节和干预,其中,金融宏观调控是指( )。
A. 财政政策的运用
B. 收入政策的运用
C. 产业政策的运用
D. 货币政策的运用
参考答案:D
答案解析:[解析] 金融宏观调控是以中央银行或货币当局为主体,以货币政策为核心,借助于各种金融工具调节货币供应量或信用量,影响社会总需求进而实现社会总供给均衡,促进金融与经济协调稳定发展的机制和过程,因此,金融

第32题: [填空题]
涎腺造影时,正常的腺体在适量的对比剂充盈时,腺泡分布均匀呈____状,若对比剂充盈不足,则可显示为_____状。
参考答案:云絮 、枯树枝

第33题: [单项选择]
通常情况下划分货币层次的依据是货币资产的( )。
A. 收益性
B. 安全性
C. 流动性
D. 可得性
参考答案:C
答案解析:[解析] 目前一般依据资产的流动性,即各种货币资产转化为通货或现实购买力的能力来划分不同的货币层次,进而就有了不同口径的货币供应量。因此,本题选C。

第34题:
[简答题]【问答题】现场勘察的内容包含哪些?
参考答案:现场勘察应查看检修(施工)作业需要停电的范围、保留的带电部位、装设接地线的位置、邻近线路、交叉跨越、多电源、自备电源、地下管线设施和作业现场的条件、环境及其他影响作业的危险点,并提出针对性的安全措施和注意事项。


第35题:
[多选题]悬索桥的主要优点有()
A. 跨越能力大
B. 刚度大
C.最能发挥材料强度
D. 受力合理
E.稳定性好
参考答案:ACD


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