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[简答题]PCR引物设计的基本要求是什么?

参考答案: 1、引物长度一般为15~30个核苷酸。过短影响PCR的特异性,过长会提高相应退火温度,使延伸温度超过TaqDNA聚合酶最适温度74℃,影响产物的生成。
2、引物的碱基尽可能随机,避免出现嘌呤、嘧啶碱基堆积现象。3’端不应有连续3个G和C。否则会使引物和模板错误配对。G+C含量一般占45%-55%。3’端和5’端引物具有相似的Tm值,Tm值计算公式:Tm=4(G+C.+2(A+T)
3、引物自身不应存在互补序列以避免折叠成发夹结构。引物的连续互补序列,一般不超过3bp。
4、两个引物之间不应存在互补序列,尤其应避免3’端的互补重叠。
5、引物与非特异扩增区的序列的同源性不超过70%,引物3’末端连续8个碱基在待扩增区以外不能有完全互补序列,否则易导致非特异性扩增。
6、引物3’端碱基是引发延伸的起点,因此一定要与模板DNA配对。引物3’端最佳碱基选择是G和C,形成的碱基配对比较稳定。
7、引物与模板结合时,引物的5’端最多可以游离十几个碱基而不影响PCR反应的进行。
8、引物的5’端可以修饰,如附加限制酶位点,引入突变位点,用生物素、荧光物质、地高辛标记其它短序列包括起始密码子、终止密码子等。

热门试题:

第1题:[单选题]提高平顺性主要减少汽车行驶时的( )。
A.固有频率
B.振动强度
C.操纵稳定性
D.使用寿命
参考答案:B


第2题:
[多选题]《铁路旅客列车服务质量规范》(空调列车)规定,日常组织培训,定期组织演练,培训演练()
A.A、有记录
B.B、有结果
C.C、有考核
D.D、有登记
参考答案:ABC


第3题: [多项选择]
下列关于增值税特殊销售方式的说法中,表述错误的有()。
A. 自产货物用于实物折扣的,应视同销售货物,该实物款额不得从货物销售额中扣除
B. 对销售除啤酒、黄酒以外的其他酒类产品收取的包装物押金,无论是否返还以及会计上如何核算,均应并入销售额征税
C. 纳税人采取以旧换新方式销售货物的,一律按照新货物的同期销售价格确定销售额
D. 采取以物易物方式销售货物的,双方都不得抵扣换进货物的进项税
E. 纳税人采取还本销售货物的,不得从销售额中减除还本支出
参考答案:C, D
答案解析:选项C,纳税人采取以旧换新方式销售货物的,应按照新货物的同期销售价格确定销售额,但是金银首饰除外;选项D,采取以物易物方式销售货物的,双方都应该作购销业务处理,如果自对方取得增值税专用发票或税务机关代

第4题: [单项选择]
有机磷中毒烟碱样症状是().
A. 瞳孔散大、血压增高、心律失常
B. 头晕、共济失调、谵妄、昏迷
C. 瞳孔缩小、流涎、肺水肿
D. 癫痫样抽搐、瞳孔不等大
E. 肌肉震颤至全身抽搐,呼吸肌麻痹
参考答案:E

第5题:
[单选题]网络计划调整的内容,不包括(  )的调整。
A.关键线路长度
B.逻辑关系
C.工程质量
D.资源投入
参考答案:C
网络计划调整的内容:①调整关键线路的长度;②调整非关键工作时差;③增、减工作项目;④调整逻辑关系;⑤重新估计某些工作的持续时间;⑥对资源的投入作相应调整。故本题选C。

第6题:
[判断题]混凝土投料高度超过3m时,应使用溜槽或串筒。
A.正确
B.错误
参考答案:B


第7题:
[单选题].单选评审专家参加政府采购活动时,下列部种情况必须回避?( )
A.参加采购活动5年前,与投标供应商存在劳动关系
B.持有投标供应商公司一定股份且实际控制公司
C.投标供应商法定代表人是评审专家工作单位领导的儿子
D.与供应商单位某中层领导是三代以内旁系血亲关系
参考答案:B
第十六条评审专家与参加采购活动的供应商存在下列利害关系之一的,应当回避:(一)参加采购活动前三年内,与供应商存在劳动关系,或者担任过供应商的董事、监事,或者是供应商的控股股东或实际控制人;(二)与供应商的法定代表人或者负责人有夫妻、直系血亲、三代以内旁系血亲或者近姻亲关系;(三)与供应商有其他可能影响政府采购活动公平、公正进行的关系。

第8题:
[单选题]男性尿道最窄处是
A.尿道外口
B.海绵体部尿道
C.球部尿道
D.尿道舟状窝
E.前列腺部尿道
参考答案:A
男性尿道有三处狭窄、三处扩大和二个弯曲。三处狭窄为尿道内口、膜部和尿道外口。三处扩大为前列腺部、尿道球部和尿道舟状窝。二个弯曲:耻骨下弯和耻骨前弯。

第9题:
[多选题] [多选]事故发展四阶段包括事故的()。
A.孕育阶段
B.准备阶段
C.成长阶段
D.爆发阶段
E.持续阶段
参考答案:ACDE


第10题:
[判断题]电容器外壳膨胀,说明内部已出现严重的绝缘故障,应更换电容器。
A.正确
B.错误
参考答案:A


第11题:
[多选题]细菌移位的原因是:( )
A. 肠道PH值改变
B. 缺血-再灌注损伤肠黏膜
C. 大量抗生素的应用致肠内菌群失调
D. 机体免疫防御功能受损
参考答案:BCD


第12题:
[单选题]11.原发型单纯疱疹的潜伏期平均为
A.1周
B.2周
C.1个月
D.2个月
E.3个月
参考答案:A


第13题: [单项选择]
t-PA溶栓治疗脑血栓形成宜在发病后多长时间内进行()
A. 1h
B. 3h
C. 6h
D. 12h
E. 24h
参考答案:B

第14题:
[单选题]如果需要长期用阿片类药物治疗,则不应选用的止痛药物是( )
A.可待因
B.吗啡
C.扑热息痛
D.哌替啶
E.芬太尼
参考答案:D


第15题:
[判断题]进入带电区域内敷设电缆时,应取得运维单位同意,设专人监护,采取安全措施,保持安全距离,防止误碰运行设备,不得踩踏运行电缆。
A.正确
B.错误
参考答案:A


第16题:
[多选题] 重汽集团打造一流生产现场的努力方向有:( )*
A.管理智能化
B.自动化设备自主研发
C.生产现场少人化
D.智慧物流的广泛运用
参考答案:ABCD


第17题:
[判断题]可以利用绳索、拉线上下杆塔或顺杆下滑。
A.正确
B.错误
参考答案:B


第18题:
[不定项选择题]A.蛛网膜下腔出血
A.TIA
B.脑出血
C.脑栓塞
D.脑血栓形成
E.患者,60岁,安静时起病,偏瘫,神志清楚,CT示脑内有低密度区。最有可能的诊断是
参考答案:E
考虑脑栓塞,其栓子可能由心脏赘生物脱落引起。

第19题: [多项选择]
有关乳腺正常分型,包括哪些().
A. 青春型
B. 腺体型
C. 青年型
D. 退化型
E. 萎缩型
参考答案:A, B, D, E
答案解析:乳腺正常分型不包括青年型。

第20题: [单项选择]
[*]
参考答案:B
答案解析:[听力原文]
F: Most students go to school by bus in this city.

本题图片是三种交通工具,因此考查的应当是交通方式,在听音时注意句

第21题: [单项选择]
适合观察药物对循环系统的作用机制分析的实验动物()。
A. 小鼠
B. 豚鼠
C. 猫
D. 兔
参考答案:C

第22题:
[判断题]根据《配电安规》,用计算机生成或打印的操作票应使用统一的票面格式。
A.正确
B.错误
参考答案:A


第23题: [单项选择]
与气的生成关系最为密切的是()
A. 肺脾肾
B. 心脾肝
C. 心肺脾
D. 脾肾
E. 肺肾心
参考答案:A

第24题:
[判断题]齐步走时左脚向正前方迈出约75厘米,按照先脚掌后脚跟的顺序着地。
A.正确
B.错误
参考答案:B


第25题: [判断题]
财务顾问应当自持续督导工作结束后15个工作日内向中国证监会、证券交易所递交“上市总结报告书”( )
参考答案:错

第26题:
[单选题]当游乐设施运行时,乘客有可能在乘人装置内移动、碰撞或者甩出、滑出时间,应设有乘客束缚装置。《GB8408-2018
大型游乐设施安全规范》
A.正确
B.错误
参考答案:A


第27题: [判断题]
波浪可对沉积物产生分选作用,大小混杂的碎屑物质在波浪分选作用下,粗粒物质上移,细粒物质下移。沉积物经过分选,形成由粗粒物质构成的滨岸堤和细粒物质构成的水下堆积台。
参考答案:对

第28题:
[单选题]高频开关电源必须设置直流输出欠压告警,具备二次下电功能的设备,应确保直流输出欠压告警先于一次下电(又称负载下电保护)动作,二次下电(又称电池低电压保护)动作电压设置值宜为( )V。
A.43. 2
B.42
C.43.6
D.46.4
参考答案:A


第29题:
[单选题]船舶操纵性是指船舶能够根据驾驶者的意图保持或改变航速、航向和位置的性能。下图中的船舶操纵装置是( )。
A.舵
B.吊舱式螺旋桨
C.侧推器
D.减摇鳍
参考答案:B


第30题:
[多选题]《消防联动控制系统》规范中规定,指示灯应以颜色进行标识,其中红色代表下列哪些状态
A.火灾报警
B.设备动作反馈
C.启动
D.延时
参考答案:ABCD


第31题:
[判断题]对于只有一名乘务员的飞机发生危险品事故时,乘务员应该与机长协商并寻求帮助
A.正确
B.错误
参考答案:A


第32题: [单项选择]
变压器正式投入运行前必须进行充电试验,应从()侧充电。
A. 高压
B. 电低压
C. 保护
D. 以上三者都有可能
参考答案:D

第33题: [单项选择]
党的十四大报告指出,坚持党的基本路线不动摇,关键是()。
A. 坚持以经济建设为中心不动摇
B. 把改革开放同四项基本原则统一起来
C. 巩固和发展安定团结的政治局面
参考答案:A

第34题:
[多选题]下列属于钢轨重伤的是()
A.钢轨明显断裂
B.钢轨头部有裂纹
C.钢轨头部有裂纹已贯通
D.掉块长度31mm深度9mm
E.钢轨底部有裂纹
参考答案:BDE


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