[简答题]用1 mol酸水解五肽，得2个Glu，1个Lys；用胰蛋白酶裂解成两碎片，在pH=7时电泳，碎片之一移向阳极，另一移向阴极；碎片之一用DNP水解得DNP-谷氨酸；用胰凝乳蛋白酶水解五肽产生两个二肽和一个游离的Glu，写出五肽顺序。

参考答案:用1 mol酸水解，得2个Glu，1个Lys，由于酸水解时Trp完全破坏，且Asn；Gln的酰胺基常被水解生成相应的氨基酸Asp、Glu和氨气，所以从回收的氨基酸情况可以推测该五肽的氨基酸组成为2Glx、2Trp、1Lys。(2)用胰蛋白酶裂解五肽，得两个肽碎片，由于该酶专一性很强，它只断裂Lys或Arg羧基端形成的肽键，所以Lys必定位于五肽的中间，-Lys-。(3)用胰凝乳蛋白酶水解五肽产生两个二肽和一个游离的Glu，因为胰凝乳蛋白酶可水解Trp羧基端形成的肽键，所以可推知该肽的氨基酸序列为：X-Trp-Y-Trp-Glu。结合(2)可知该五肽序列为X-Trp-Lys-Trp-Glu。(4)碎片之一用DNP水解得DNP-谷氨酸，DNP是鉴定N端氨基酸，所以该五肽为：Glx-Trp-Lys-Trp-Glu。(5)用胰蛋白酶裂解成两碎片，即为Glx-Trp-Lys和Trp-Glu，在pH=7时电泳，Trp-Glu带负电荷，向阳极移动；而Glx-Trp-Lys向阴极移动，说明Glx是Gln而不是Glu。综上所述该五肽的序列为：Gln-Trp-Lys-Trp-Glu。