[简答题]简述冻精的原理及牛冻精的制作。

参考答案:冻精的原理：精子在冷冻状态下，代谢几乎停止，生命以相对静止保存下来，一旦升温又能复苏而不失去受精能力。复苏的关键在于在冷冻过程中，精子在冷冻保护剂的作用下，防止了细胞内水的冰晶化所造成的破坏作用。
冻精制作：
1.采精检查按常规方法采取种公牛的精液，并对其精液进行常规检查。
2.配制稀释液和解冻液冷冻保存稀释液的成分应具有低温保存剂（卵黄、奶类）、防冻剂（甘油）、维持渗透压物质（糖类、柠檬酸钠等）、抗菌素及其他添加剂。
3.稀释一次稀释法：常用于颗粒精液，将含有抗冻剂的稀释液按比例一次加到精液内。二次稀释法：等温条件下用不含甘油的Ⅰ液做第一次稀释，经过40到60分钟缓慢降至4到5℃，再加入含有甘油的Ⅱ液稀释。三次稀释法：猪精液常采用这种稀释方法。
4.平衡（O一5℃）方法将稀释好的精液塞上瓶塞，用少量棉花或3—4层纱布包裹，放入冰箱或广口瓶内，在0—5℃条件下放置1—2小时或4—5小时（如精液稀释后过多，可分装于5—10毫升小瓶内进行平衡）。
5.冻结方法：
（1）干冰埋藏发法：以干冰为冷源，将干冰置于木盒上，铺平压实后，用模板在干冰上压孔，然后将经过降温平衡至5℃的精液滴入压孔内。再用干冰封埋2到4分钟，收集冻精放入液氮或干冰内储存。
（2）液氮熏蒸法：以液氮为冷源，通过调节距液氮的距离和时间掌握降温速度。在装有液氮的广口瓶或者铝盒上，置一铜丝网上，距液氮面1~3cm处预冷数分钟，使其温度维持在-80~-100℃。也可用聚四氟乙烯板代替铜丝网，当精液颜色变白时，将颗粒精液收集于储瓶内，移入液氮罐储存。