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[多项选择]Sanger双脱氧链终止法中,所用的DNA聚合酶有( )。
A. Klenow酶
B. Taq DNA聚合酶
C. DNA聚合酶Ⅲ
D. 末端转移酶
[填空题]Sanger双脱氧链终止法中,进行放射性标记的核素常为______和______。
[简答题]利用双脱氧链终止法测定仪DNA片段的碱基序列获得如下图谱。
写出由引物合成的DNA核苷酸链的碱基序列,标出5’和3’端;
[简答题]利用双脱氧链终止法测定仪DNA片段的碱基序列获得如下图谱。
写出作为模板的DNA链的碱基序列,标出5’和3’端。
[填空题]双脱氧链终止法测定DNA碱基序列需要的试剂为______、______、______和______等。
[单项选择]Maxam-Gilbert化学裂解法与Sanger双脱氧末端终止法相比,最明显的优点是()
A. 不需要加入2',3'-双脱氧核苷三磷酸底物
B. 不需要DNA聚合酶的参与
C. 不需要进行核素标记
D. 所测序列来自原DNA分子本身
E. 所测序列来自酶促反应的拷贝
[单项选择]双脱氧核苷酸常用于DNA测序,其结构与脱氧核苷酸相似,能参与DNA的合成,且遵循碱基互补配对原则。DNA合成时,在DNA聚合酶作用下,若连接上的是双脱氧核苷酸,子链延伸终止;若连接上的是脱氧核苷酸,子链延伸继续。在人工合成体系中,有适量的GTACATACATC的单链模板、胸腺嘧啶双脱氧核苷酸和4种脱氧核苷酸,则以该链为模板合成出的不同长度的子链最多有()。
A. 2种
B. 3种
C. 4种
D. 5种
[多项选择]Sanger测序法的基本原理和优点是( )。
A. 以双脱氧底物取代正常底物
B. 碱基与特殊染料间不同的相互作用
C. 一个合成引物的延伸和DNA修复合成的可靠终止
D. 反应是DNA特异的,RNA不会干扰
[单项选择]双脱氧末端终止法测序体系与PCR反应体系的主要区别是前者含有
A. 模板
B. 引物
C. DNA聚合酶
D. ddNTP
E. 缓冲液
[单项选择]以下哪一项不是双脱氧法测序反应体系中必须加入的成分:
A. DNA引物
B. DNA聚合酶
C. dNTP
D. DNA奎接酶
[简答题]使用双脱氧法测定DNA序列的实验中,靠近或远离测序引物的核苷酸序列经常会测不准,请解释原因并提出简单易行的方法解决上述问题。